在機體內部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色 質的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內源性核酸內切 酶被激活,細胞自身的染色質或 DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產生與 DNA 斷點數(shù)目相同 的 3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase )可以將地高辛標 記的 dUTP (DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結合在 DNA 斷點部位,可以通過生物標 記的抗地高辛抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后,再結合鏈酶親和素-過氧化物酶(SABC),然后加入 顯色底物 DAB 予以顯示。凋亡的細包核呈黃色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。
注意事項
1. 試劑盒嚴格-20℃存放。
2.初用時如試管底部無可見的試劑,在離心機離心 5 分鐘,使試劑沉至管底。
3.檢測過程中切勿使樣品干涸。
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