白色結晶或結晶性粉末。味甜，甜度約為蔗糖的70%。無臭或略有特征性氣味。相對密度d4201.525(含水物)。有還原性和右旋光性。分α-型和β-型兩種異構體。
α-乳糖可被酸和乳糖酶分解成葡萄糖和半乳糖，可受乳酸菌類的作用而成為乳酸，但酵母不能利用。
在水中結晶析出者，為一水化物C12 H22O11.H2O，如在120℃下加熱，可成為無水物。無水物熔點201～202℃，1g可溶于5ml水或2.6ml熱水，微溶于乙醇，不溶于乙醚。
β-型乳糖在93℃以上的熱水中析出，溶解度不同于α-型，1g溶于2.2ml水或1.1ml熱水。熔點252℃，旋光度[α]D20+53.6°。在2%硫酸乳濁液中可水解為葡萄糖和半乳糖。
僅存在于動物乳汁中，人乳中約含7%(5%～8%)，牛乳中約含4.5%(4%～5%)。在體溫狀態時，按二份α-型和三份β-型的比例混合而成平衡狀態。普通乳糖商品為α-型。

1、 摩爾折射率：71.47

2、 摩爾體積（cm3/mol）：202.7

3、 等張比容（90.2K）：648.4

4、 表面張力（dyne/cm）：104.5

5、 極化率（10-24cm3）：28.33