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克隆化顯微鏡操作方法

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克隆法顯微鏡操作方法
　　在直徑6cm培養皿中，加入1ml1.0×108細胞懸液放置5%CO2飽和濕度，37℃溫箱中放置30min以上，倒置顯微鏡下，尋找那些與周圍相距甚遠的單個細胞，將毛細管口（一頭有直角彎頭毛細管，一頭連接一尺長乳膠管，用口控制液體進入）水平置放于液面上，左右微動，直到看見管口，對準細胞，吸入毛細管，將管中細胞移到預先加有2.0×104~5.0×104飼養細胞96孔板內，培養后，即可獲得單個細胞形成的克隆。
克隆法熒光激活分離法
　　用一種熒光激活細胞分類器（FluoresceinActivafedCellSorter，FACS）。其基本原理是：將細胞經熒光抗體染色后，經噴嘴形成單個細胞的線形液滴，在萊塞光激發下，熒光素發射熒光，此信號由光電倍增管接收，再結合細胞形態大小產生光散射信號，經電腦處理，產生信號并與預定的信號對比，根據細胞熒光強度及細胞大小不同，將細胞分成不同級別，在電場中發生偏離，而分別收集于不同容器中。

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